尺寸排阻色譜柱的特點(diǎn)與清洗方法

尺寸排阻色譜（SEC）是一種分析技術(shù)，可以按尺寸并根據(jù)從填有多孔硅膠的色譜柱中洗脫的情況來分離已溶解的大分子，用于測量蛋白質(zhì)分子量、結(jié)構(gòu)、大小及構(gòu)成。

 

當(dāng) SEC 與光散射、粘度計(jì)以及濃度檢測器相結(jié)合（稱為三重檢測）時(shí)，可測量分子量、分子大小和特性粘度，并生成關(guān)于大分子結(jié)構(gòu)、構(gòu)象聚集與支化方面的信息。

 

通過使用 SEC 來測量分子量和其他特性，可以對蛋白質(zhì)、合成聚合物和多糖類之類的天然聚合物等分子進(jìn)行表征。 

 

尺寸排阻色譜的特點(diǎn)：

 

1.保留時(shí)間是分子尺寸的函數(shù)，有可能提供分子結(jié)構(gòu)的某些信息。

2.保留時(shí)間短，譜峰窄，易檢測，可采用靈敏度較低的檢測器。

3.固定相與分子間作用力極弱，趨于零。由于 ,柱子不能很強(qiáng)保留分子因此柱壽命長。

4.不能分辨分子大小相近的化合物，相對分子質(zhì)量差別必須大于10%能得以分離。

5.大分子的流程短，移動(dòng)速度快，先流出色譜柱；小分子的流程長，移動(dòng)速度慢，后流出色柱；而中等分子居兩者之間。

6.生物相容性好，有很高的活性回收率。

 

尺寸排阻色譜柱的清洗：

 

多次使用后某些樣品可能會吸附到入口篩板或填料上，當(dāng)積累至一定程度時(shí)會出現(xiàn)壓力升高并伴隨峰型展寬的現(xiàn)象，此時(shí)需要清洗色譜柱。一般流程為：斷開檢測器，反接色譜柱，在低于50%較大推薦流速下用清洗液沖洗10-15倍柱體積。